小鼠固定器临床使用结果研究
来源：未知 |发布时间：2021-04-28 16:01|点击:次
小鼠固定器动情周期观察造模10d后，连续行2个性周期（每个周期5d）的小鼠固定器阴道脱落细胞涂片，观察动情周期的变化，动情前期涂片特征：以小、圆、有核上皮细胞（鳞状上皮细胞）存在为特征；动情期：以不规则（角质化）的鳞状上皮细胞为特征；动情后期：以白细胞和角质化细胞为特征；动情间期：白细胞和圆上皮细胞出现为特征。参照文献，小鼠固定器失去规律的动情周期，或持续处于动情间期，则提示无排卵。
2.4标本采集造模第20天，晚８时开始禁食不禁水。翌日尾静脉采血，分离血清用于T、FSH、LH检测，随后正常组及造模组各取2只麻醉（10%水合氯醛，3mL／kg）行腹腔注射麻醉取卵巢，进行卵巢组织形态学观察。第４８天晚８时开始禁食不禁水，翌日称重麻醉，腹主动脉采血４mL，分离血清用于性激素检测。分别完整取出双侧卵巢，剪去卵巢周围脂肪组织，称重并观察其外观。将小鼠固定器双侧卵巢用PBS冲洗后置于EP管中，加入４%多聚甲醛，使其浸泡其中，待病理切片，用于卵巢组织形态学观察。
2.5观察指标及方法
2.5.1卵巢指数于末次给药后，晚８时开始禁食不禁水，于次日晨称重。分别完整取出双侧卵巢，称重并计算卵巢指数。
卵巢指数＝卵巢重量（mg）／体质量（g）×100%
2.5.2卵巢组织形态学观察体式镜下观察卵巢组织外观；选取卵巢的最大平面进行石蜡包埋，蜡块分别以４μm厚度进行连续切片，行苏木素-伊红（HE）染色并观察。
2.5.3血清性激素检测采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中T、FSH、LH的含量，具体操作严格按照试剂盒说明书进行。在酶标仪上进行检测，根据酶联免疫反应后显色的深浅即吸光度值的大小判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
2.6统计学方法采用SPSS21.0统计学软件分析。若计量资料符合正态分布，数据以（x±s）表示，2组比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，满足方差齐性检时，采用LSD方法分析比较组间差异，方差不齐时，两两比较选择DunnettT3方法；若不符合正态分布则进行两样本或多组秩和检验，数据以中位数和四分位数描述。
3结果
3.2正常组和造模组小鼠固定器动情周期变化正常组动情周期变化规律，按照动情间期、动情前期、动情期、动情后期规律进行；造模组动情周期失去规律性。
3.3体质量和血清性激素水平比较。
3.4卵巢组织HE染色第21天正常组镜下可见各级卵泡，成熟卵泡结构完整（箭头所指），有卵丘、卵细胞及放射冠，卵巢颗粒细胞层多为８～9层；造成熟卵泡（箭头所指），无卵母细胞及卵丘，卵巢颗粒细胞层减少且排列稀疏。第４9天正常组镜下可见各级卵泡，成熟卵泡结构完整（箭头所指），有卵丘、卵细胞及放射冠，卵巢颗粒细胞层多为８～9层；模型组Ⅰ及模型组Ⅱ镜下可见卵巢呈多囊样变，无成熟卵泡（箭头所指），无卵母细胞及卵丘，卵巢颗粒细胞层多为1～3层，且排列稀疏，少见黄体。与模型组Ⅰ相比，模型组Ⅱ黄体数量较少，卵泡呈变形状态。
3.5第４9天卵巢组织形态观察正常组小鼠固定器的卵巢形态正常，色泽红润；模型组Ⅰ卵巢表面苍白，卵巢表面可见单个或较多的囊性扩张卵泡；模型组Ⅱ呈乳白色样变。
3.6第４9天3组小鼠固定器卵巢指数和黄体数比较。
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