小鼠固定架，小鼠固定器的价格
来源：未知 |发布时间：2021-04-09 14:57|点击:次
IL-17介导山羊传染性胸膜肺炎小鼠模型肺部炎症反应研究
山羊传染性胸膜肺炎(Contagious caprine pleu-ropneumoniae,CCPP)是一种高度接触性传染病,可引起严重的呼吸道症状,其呼吸道症状可演变为致命性和全身性的急性或慢性胸膜肺炎。该病由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma ca pricolumsubsp.ca pri pneumoniae , Mccp)引起,病原的模式株为F38。CCPP通常以咳嗽、严重的呼吸窘迫、发热、流鼻涕、虚脱和产奶量下降为临床特征,一般潜伏期为18 d~20 d。剖检患畜可见纤维性胸膜气肿,胸腔积液增多,胸水清亮，肺脏呈明显的实质性肝变,切面表现出细小的纹理，肺炎通常是单侧的。
CCPP的流行对全球山羊养殖构成了严重威胁。
近年对CCPP的研究多集中在病原分离鉴定和流行病学调查,该病的免疫致病机制研究较少。肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae ,MP)等病原在啮齿类动物中广泛存在,人类慢性支气管炎、支气管扩张和肺气肿与小鼠感染MP等引起的呼吸系统疾病在形态学上相似,小鼠成为研究慢性肺部炎症发病机制的有效模型。研究显示,IL-17 缺陷型小鼠对各种呼吸道病原体的易感性增加,包括肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌、肺炎支原体、铜绿假单胞菌等。本研究借鉴MP小鼠肺炎模型的建立和相关免疫致病机制的研究,构建Mccp诱导的CCPP小鼠模型，探究IL-17参与肺部炎症反应，为后续进一步阐述CCPP的免疫致病机制、病原和机体之间的关系奠定基础。
1材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株及主要试剂
F38模式株由中国农业科学院兰州兽医研究所赠送;Lysis buffer. PBS、改良MEM-KM2培养基等为常规生化试剂;real-timePCR和常规PCR引物由invitrogen公司合成;real-time PCR和常规PCR所用试剂;IL-17 ELISA检测试剂盒、流式细胞术检测抗体( antibody, Ab) (a CD16/CD32 Ab、FITC .anti-F4/80 Ab. PE/cy7 anti-CD11b Ab、 APC anti-Ly6G Ab、Percp/cy5.5 anti-CD45.2 Ab)。
1.1.2 主要仪器
恒温培养振荡器(HNY-2102C);全自动凝胶成像仪(ChampGel 6000);PCR仪(T100);荧光定量PCR仪(quantstudio6flex);手动轮转式切片机(LeicaRM2235);酶标仪(Bio-Rad680);流式细胞仪(BD FAC-SAriaTM II)。
1.1.3实验动物20只6周龄~8周龄SPF雌性Balb/c小鼠,购自成都达硕实验动物有限公司。随机分成试验组和对照组,每组10只。所有小鼠圈养在恒定湿度(60%士5%)和温度(24°C士1°C)的条件下,对舍饲环境进行定期消毒和紫外灭菌,光照周期为12h(.上午9:00至下午9:00),自由采食和饮水。
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