实验大鼠的补气作用及机制研究方法讨论
来源：未知 |发布时间：2021-03-13 10:18|点击:次
讨论
黄芪是一味健脾益气.扶正固本的要药,在临床中应用广泛,常用于治疗气虚自汗、盗汗﹑浮肿.痛疽不溃或溃久不敛.脾虚泄泻及各种气衰血虚之症叫。
本研究基于黄芪补气功效,对其活性物质总皂苷的补气作用及相关机制进行了探讨。根据“人之所受气者,谷也”(《灵枢·玉版篇》)“谷不入半日则气衰,以日则气少矣”(《灵枢·五味篇》)、“劳则气耗”(《素问·举痛论》)等中医基础理论".限食可致“气”的生成不足,疲劳则耗气,故本研究采用“饮食不节+疲劳"法构建气虚动物模型。补中益气丸具有调补脾胃﹑益气升阳的功效,主治脾胃虚弱、中气下陷等脾气虚之症",而本研究的造模方式主要是造成气虚之脾气虚,故选择补脾气的补中益气丸作为阳性对照药。
气虚最直接和客观的表现是疲劳、运动耐力.免疫力下降,而力竭游泳时间是反映运动耐力的重要指标"。气虚则机体免疫功能下降,而胸腺.脾与机体的免疫功能密切相关。
作为重要的外周免疫器官,胸腺和脾是T.B淋巴细胞成熟.分化及免疫应答的重要场所,其体积大小是评价机体非特异性免疫的重要指标P。脾T淋巴细胞亚群CD3和CD4主管细胞免疫,具有抗病毒和调节免疫系统功能的作用。
在本研究中,黄芪总皂苷组大鼠表现出较好的运动耐力,给药后其负重力竭游泳时间显著延长,证实了黄芪总皂苷具有缓解疲劳的作用;并且,黄芪总皂苷能显著升高气虚模型大鼠的脾指数和脾T淋巴细胞亚群CD3水平,从而起到增强免疫的作用。通过与阳性对照药比较发现,高剂量黄芪总皂苷在升高气虚模型大鼠脾指数.脾T淋巴细胞亚群CD3水平以及延长负重力竭游泳时间方面的效果更优。
高能磷酸化合物,尤其是ATP.是心肌能量的直接提供者,可直接进入细胞,在线粒体中通过磷酸化反应参与能量传递。ATP储备水平的高低不仅直接关系着细胞正常生理功能的维持,还与细胞生长及调亡密切相关,而增加高能磷酸化合物水平可以促进心肌膜电位和舒缩功能的维持,防止细胞洞亡,对心肌具有保护作用哂。
ATP不能经自由扩散方式通过线粒体膜,而必须先由位于线粒体内膜的腺苷酸转位酶(ANT)转运到细胞质才能被细胞利用。ANT能将线粒体内合成的ATP转运至膜间隙.同时催化线粒体外的ADP转入线粒体基质,以供再合成ATP,在为线粒体磷酸化过程提供ADP的同时也刺激了氧化呼吸作用,从而确保线粒体能量转换的顺利进行13%。本研究结果显示,气虚模型大鼠肝组织中ATP、ADP水平均显著降低;而给予黄芪总皂苷后,黄芪总皂苷组大鼠肝组织中ATP、ADP水平均显著升高;并且,高剂量黄芪总皂苷在升高ATP水平方面的作用显著优于低剂量黄芪总皂苷和阳性对照药。
MDA是体内脂质过氧化物的重要代谢产物.其水平量高低能较好地反映组织脂质过氧化程度,还可间接反映细胞损伤程度。SOD作为反映氧自由基清除能力的指标,对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,可防止自由基对机体的直接和间接损伤P-。CK.LDH均为细胞内酶,当细胞正常时其活性低,当各种原因引发细胞膜通透性增加或细胞凋亡时其活性增强;其中,CK分布于心肌、骨骼肌和脑组织中,大量高负荷运动后,细胞能量代谢消耗过多,可导致血清中CK及其同工酶水平升高吧。
乳酸是糖酵解的主要代谢产物,机体中乳酸含量与疲劳程度呈正相关。在本研究中,黄芪总皂苷可较好地降低气虚模型大鼠血清中MDA、乳酸和CK水平。这提示其可以通过减少乳酸的产生来减少乳酸在体内的积累,同时降低CK活力;并且,高.低剂量黄芪总皂苷在降低MDA水平方面的作用显著优于阳性对照药。
ALB是人体血浆中的重要载体蛋白,可维持机体营养与渗透压,许多水溶性差的物质可以通过与ALB结合而被运输;当其含量降低时,提示机体可能存在营养不良的情况,且可能存在物质转运功能失衡P。在本研究中,模型组大鼠ALB水平显著降低,说明气虚模型大鼠体内已经存在了物质转运功能失衡﹑营养不良的状况。给予黄芪总皂苷后,黄芪总皂苷高剂量组大鼠ALB水平显著升高,说明黄芪皂苷有一定调节人体营养平衡的作用。临床常用HGB和RBC来评价患者有无贫血及其严重程度宁。在本研究中,模型组大鼠全血中HGB RBC与正常组比较均没有显著差异,说明大鼠只是气虚尚未发展到血虚;高剂量黄芪总皂苷可以一定程度升高气虚大鼠的RBC,提示其具有一定的补血作用。
Thl细胞分泌的-2可抑制Th2细胞刺激B淋巴细胞合成免疫球蛋白E(IgE)P。IL-12是促进Thl细胞分化的关键细胞因子,是细胞免疫中一类重要的调节因子,其能够抑制B淋巴细胞合成IgE,抑制肥大细胞和嗜碱性粒细胞Th2型细胞因子的合成P"雪。
力竭游泳运动使心肌缺血缺氧.引起心脏受损时,机体自身能够产生TNF-α, TNF-a作为致炎细胞因子可致白细胞趋化.聚积并释放化学物质从而引起组织损伤P。本研究结果显示,黄芪总皂苷可通过显著提高抑炎因子IL-2水平.降低促炎因子TNF-α水平来调节体内的炎症反应,这提示其能够调节气虚模型大鼠的炎症过程和免疫过程。
综上所述,黄芪总皂苷可通过减少机体乳酸的积累,降低CK活性.体内脂质过氧化物水平以及调节免疫,从而起到补气.延缓疲劳发生增强运动耐力的作用。本研究结果初步阐明了黄芪总皂苷补气的作用机制,为对其深人开发利用提供了科学依据,但其更具体的作用机制还有待进一步研究。
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